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IOS过表达稳转细胞系构建服务

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年来致力于细胞生物学技术研究。外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的蛋白,称为稳定细胞系。稳定细胞系的构建与筛选是研究目的基因的功能常用的手段。稳定细胞株的构建周期长、难度大,每一步都很关键,卡梅德生物在稳定细胞株构建方面积累了丰富的经验,我们的细胞技术人员精准把控实验环节中的每一步操作,对于难转染的细胞采用电转法可以做到较高的转染效率,凭借其精湛技术能够快速完成实验内容,同时保证数据结果真实可靠。卡梅德生物建立了标准的细胞技术服务体系,具备成熟的细胞实验服务平台,服务内容丰富详细,可为客户提供包括过表达、沉默稳转细胞系构建等多种技术服务。我们能够按照客户的要求完成目的基因过表达细胞株的构建和测试,提供高质量的基因过表达稳定细胞株。

构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。常用的真核表达载体的筛选标志物有潮霉素(hygromycin),嘌呤霉素(puromycin)和 G418。稳定细胞系表达的蛋白/抗体具有稳定性好,批次差异性更小的优点。

卡梅德生物具有成熟的IOS(Integration Operating System)重组技术,基于该技术,我们为您提供目的基因的过表达稳定株系构建服务。利用IOS技术,将目的基因定点整合到经过筛选验证过的基因组高表达活性位点中, 这些位点不仅安全(无基因),而且基因表达量更高(活跃表达位点),因此可以实现目的基因过表达,并能长期稳定遗传。实验周期大大缩短,整合效率高。并且基因整合不限长度,可同时整合多个基因,实现多基因共表达。

 

技术原理:

 

项目

IOS过表达稳转细胞系构建服务

实验原理

IOS过表达稳转细胞系技术原理:特异性的寡聚核苷酸序列识别靶基因,打开双链,引起构象变化;专利的RP蛋白特异识别靶位点并与之结合,引起DNA损伤,从而启动DNA损伤修复机制;同时,二聚体RP可牵引外源供体基因至损伤DNA处,提高了重组的几率。

优点

·定点整合,非随机整合

·稳定遗传,传代过程中,基因不会丢失

·基因大小不影响整合的效率

·定点整合的位点为高表达位点,基因的表达量高

·可同时整合多个基因,实现多基因共表达

 

 

1IOS基因重组技术原理图

 

项目流程:

我们的服务优势:

 

--成熟稳定的细胞技术平台:拥有品种齐全的细胞库资源,多种不同启动子和标签的表达载体可供选择;

--利用IOS技术,实验周期大大缩短,整合效率高,基因整合稳定;

--设施齐全,拥有标准细胞实验室,实验体系成熟,配备齐全的实验仪器;

--经验丰富的实验技术人员,精湛的操作水平,较好的电转效率,成功率高,数据结果完善准确,可为您提供高品质的技术服务;

--细胞来源清晰,质量有保证:无细菌、真菌和支原体污染;

--具备完善的细胞、抗体、蛋白等服务平台,能够提供从载体设计到蛋白检测等一站式技术服务

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-022-8216-4980/156-0119-0182或发送邮件到info@kmdbioscience.com