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肺炎克雷伯菌基因编辑

卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,高效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的 编辑服务,以满足客户的需求。

肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae)为革兰阴性杆菌,为较短粗的杆菌,无芽胞,无鞭毛,有较厚的荚膜,多数有菌毛。营养要求不高,有普通琼脂培养基上形成较大的灰白色粘液菌落,以接种环挑之,易拉成丝,有助鉴别。在肠道杆菌选择性培养基上能发酵乳糖,呈现有色菌落。肺炎克雷伯菌是世界上最常见的医院病原体之一,也是新生儿败血症的主要原因。除了作为医院病原体的重要性之外,肺炎克雷伯菌还可以生活在广泛的宿主相关和环境生态位中,并表现出广泛的表型和遗传多样性。因此,通过基因编辑技术在染色体水平上进行靶基因的敲除、 插入或替换, 可以降低肺炎克雷伯菌的抗药性也为发现新的药物靶标提供了有效的工具。

 

传统λRed同源重组法:

 

肺炎克雷伯菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组.但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。

 

图1 传统λRed同源重组法

 

CRISPR/Cas9基因编辑技术:

 

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更精准,非常便于您开展后续的实验研究。

 

 

 图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

服务内容:

  

服务内容

周期

基因敲除

客户提供:

*需改造的菌株信息

*敲除的序列信息

5-8周

基因敲入或点突变

客户提供:

*需改造的菌株信息

*敲除的序列信息/突变位点信息

5-8周

 

卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度精确和高效的无疤痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌枯草芽孢杆菌沙门氏菌毕赤酵母酿酒酵母白色念珠菌金黄色葡萄球菌铜绿甲假单胞菌乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系

 

服务优势:

 

--快速的实验周期,节省客户成本

--成熟的实验技术,实现无疤痕基因组编辑

--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目

--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-400-621-6806或发送邮件至info@kmdbioscience.com