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抗体酶标记与交联服务

卡梅德生物科技为客户提供多种形式的高质量抗体标记服务。


抗体标记与交联服务

抗体和蛋白可以利用不同的化学偶联方式跟不同的报告酶,如辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)进行交联,以最大限度的保留标记后的抗体或酶的活性。经过酶标记的抗体或蛋白可以用于ELISA,免疫印迹,原位杂交,细胞和组织化学检测试验。我们建立一套完整的策略和计算方案以保证酶/蛋白偶联比接近1:1,以最大限度地保留标记物的活性。抗体都有独自的特性,在酶偶联标记过程开始前,我们会对抗体进行质控检验。通常需要花费1-2个礼拜进行整个标记过程,同时我们也可以按照您的要求进行抗体或蛋白标记。

 

卡梅德生物提供的酶偶联服务:

 

---抗体AP(碱性磷酸酶)标记服务
碱性磷酸酶(AP)是一种水解酶,常用于抗体标记,催化底物对硝基苯酚形成黄色物质,于405nM波长处读取吸光值,其催化效率比辣根过氧化物酶(HRP)要低很多,优点是:催化动力学反应稳定,形成的底物线性积累。


---抗体HRP(辣根过氧化物酶)标记服务
HRP标记的抗体可以广泛用于ELISAs, Westerns Blots 和免疫组化(IHC). 在ELISA实验中通常采用HRP标记检测抗体,催化底物形成蓝色的化学物,优点是催化反应效率高,通常在10-30分钟内可以完成显色反应(AP:2-4小时)。

 

---β半乳糖苷酶(β-galactosidase)标记

β半乳糖苷酶(β-galactosidase)被广泛用于分子生物学中酶报告系统。β半乳糖苷酶标记抗体通常用于光度测定和电化学酶多样性试验检测技术(electrochemical enzyme-multiplied assay techniques , EMATs)。

 

---抗体生物素(Biotin)标记服务

生物素也是常被用于抗体、蛋白标记的生物分子之一,能够高亲和力的结合四聚体链亲和素,包括链亲和素和中性亲和素,因此被广泛用于western Blots,IHC 和ELISA。

 

---葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase)标记
Glucose oxidase (GOx)来自黑曲霉,单体分子量为80kDa, 可以催化葡萄糖形成过氧化氢,缺点是容易形成二聚体形式。经过葡萄糖氧化酶标记的结合物常用于食品工业发酵过程检测和糖尿病诊断的传感器制备。

 

---抗体荧光染料标记服务

与酶标记物不同,荧光染料属于小分子化合物,我们优秀的科学家会采取最严格的质控管理条例,对每一个标记项目进行QC和QA双重监控。我们可以为您提供的荧光染料标记服务包括:

 

Fluorescein Derivatives Rhodamine Derivatives
Coumarin Derivatives BODIPY Derivatives
Cascade Blue Derivatives Lucifer Yellow Derivatives
Phycobiliprotein Derivatives Organometalic Compound
FAM系列 FITC

 

主要标记过程:

抗体-酶经过偶联过程后,最终产生的结合物需要去除过量的未反应试剂,如还原剂,一般情况下可以通过透析法直接去除。但是在具体案例中,还需额外的纯化技术,如超滤,切向流(TFF)和凝胶色谱进行结合物纯化。如果交联酶分子量大小接近或大于需要标记的抗体、蛋白分子量大小,亲和色谱纯化,离子交换柱和疏水柱层析则较为常用。


交联结合物最终需要经过生物化学和生物物理学分析,如MALDI-top,ESI,LC-MS Fluorescence,SDS-PAGE,IHC和酶动力学分析等以保证最佳品质的产品生产制备. 除此之外,我们的QC (quality control) 和QA (quality assurance) 程序为您的产品提供双重质量保证,让您能够把控产品生产的每一个环节。