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枯草芽孢杆菌基因编辑

卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。

枯草杆菌Bacillus subtilis是芽孢杆菌属的一种,广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖而得名。无荚膜,有鞭毛,能活动,革兰氏染色为阳性。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时常形成皱壁,为需氧型细菌。可以利用蛋白质、 多种糖,分解色氨酸。其中枯草杆菌在生物防治上很具有潜力,在温度和通气等适宜条件下,幼龄细胞中大量形成芽孢。另外,枯草杆菌生长速度快,对营养要求比较低,能有效分泌许多蛋白及代谢产物,且其不会产生毒素,是一种无致病性的安全微生物。在医药卫生食品等方面用途很广。

 

传统λRed同源重组法:

 

枯草芽孢杆菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。

 

图1 传统λRed同源重组法

 

CRISPR/Cas9基因编辑技术:

 

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。

 

 

 图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

服务内容:

 

服务内容

周期

基因敲除

客户提供:

* 需改造的菌株信息

* 敲除的序列信息

5-8周

基因敲入或点突变

客户提供:

* 需改造的菌株信息

* 敲除的序列信息/突变位点信息

5-8周

 

卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无疤痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌枯草芽孢杆菌沙门氏菌毕赤酵母酿酒酵母白色念珠菌金黄色葡萄球菌铜绿甲假单胞菌乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系

 

服务优势:

 

--快速的实验周期,节省客户成本

--成熟的实验技术,实现无疤痕基因组编辑

--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目

--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持

 

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