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磷酸化抗体制备服务

卡梅德生物拥有多年的抗体制备经验,能够开发性能不弱于细胞信号转导公司(CST)磷酸化多克隆抗体和单克隆抗体。我们提供的针对特定磷酸化位点的多克隆及单克隆抗体定制服务,目前交付成功率高达100%。另外,公司还为客户提供全面的磷酸化抗体验证服务,包括磷酸化与非磷酸化的抗原交叉反应,Western Blot 和免疫组化。

 

抗体制备服务 — 磷酸化抗体制备

蛋白磷酸化是细胞中非常重要的后翻译修饰作用(PTM),主要涉及到蛋白生物活性水平的调节,包括活化或抑制蛋白质活性,从而进一步调节细胞信号转导通路。在真核生物中,蛋白质磷酸化位点为丝氨酸,苏氨酸和酪氨酸;在原核生物中磷酸化位点主要为组氨酸。卡梅德生物为客户提供不同方案的磷酸化抗体制备服务,包括传统抗体制备,如鼠单克隆杂交瘤制备技术与多克隆抗体制备技术,以及非传统的重组抗体制备技术

基于传统抗体制备技术的磷酸化抗体制备服务:

磷酸化位点的分析,磷酸化与非磷酸化多肽抗原设计与合成,动物免疫与血清效价评价以及抗体纯化与配对服务。

 

服务流程与内容如下表所示: 

 

 

项目名称

服务内容

交付结果

抗原设计与合成

1.客户提供抗原(多肽,蛋白),纯度>90%

2.卡梅德设计与合成磷酸化与非磷酸化抗原(可选)

抗原由卡梅德制备)

*磷酸化与非磷酸化抗原的MSHPLC报告

*2-5 mg磷酸化多肽,纯度>90%

*2-5 mg非磷酸化多肽,纯度>90%

单克隆抗体制备

1.免疫Balb/c 小鼠(采用独有小鼠免疫佐剂,20天即可快速产生高抗体滴度血清)ELISA检测血清效价

2.取脾细胞进行细胞融合(sp2/0或者NS0瘤细胞)

3.细胞克隆与亚克隆,含细胞培养上清抗体ELISA效价与交叉性验证

*2-5个抗体杂交瘤细胞株

*2-5 mg纯化抗体

*ELISA报告

*至少一株单克隆抗体识别磷酸化与非磷酸化抗原效率相差1000

*Western Blot验证报告(可选)

多克隆抗体制备

1.免疫2-3 新西兰大白兔(采用独有兔专用免疫佐剂,28天可产生高抗体滴度),ELISA检测血清效价

2.血清收集与ELISA效价检测

3.抗原亲和纯化(推荐)或protein A纯化

4抗体使用稀释倍数验证(客户需提供实验样品)

*1-2ml免疫前血清

*1-5 mg纯化抗体

*ELISA报告

*抗体识别磷酸化与非磷酸化抗原效率相差1000

*Western Blot验证报告(可选)

 

项目特征:

*全程可追溯的文件支撑体系,GMP/GLP级别

*高抗体效价:保证型抗体ELISA效价可达~105

*高通量的抗体筛选平台:日筛10,000个克隆