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磷酸化位点鉴定服务

卡梅德生物长期以来一直专注于优化我们的质谱技术平台。我们开发了一条完整的蛋白质鉴定流程,从样品制备、蛋白质分离纯化、质量分析,最后到系统的生物信息学分析。我们的蛋白质鉴定服务采用最新技术和优化方案,成功率接近100%

磷酸化是细胞信号通路中重要的共价翻译后修饰 (PTM)。这种修饰是一个可逆过程,由蛋白激酶催化。研究表明,超过 30% 的真核蛋白质会发生磷酸化。磷酸化修饰对靶蛋白主要有两种调控机制:(1)磷酸化可能引起修饰蛋白结构的构象变化,如酶和受体,开启或关闭功能。(2) 磷酸化改变了蛋白质对其效应子的亲和力,通过这样做,磷酸化的蛋白质可以招募或释放其下游效应子。因此,可以想象磷酸化修饰调节了广泛的生物活动,如细胞生长、细胞代谢、细胞分裂等。

真核生物中的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基可能发生磷酸化。在这四种磷酸化中,酪氨酸磷酸化最为罕见,但非常关键。最著名的酪氨酸激酶受体位于 MAPK 通路的最上游,调节 Ras 和其他激酶,启动磷酸化级联反应。

卡梅德生物建立了一个高灵敏度的 HPLC-MS/MS 管道,可以分析真核和原核生物中的多种磷酸化。

 

服务流程

 

 

1 蛋白磷酸化位点鉴定流程

磷酸化位点的鉴定包括富集磷酸化肽,然后进行质谱分析。富集磷酸化肽段,这一步很关键,因为磷酸化蛋白质占总蛋白数量的1%-2%。在每次实验操作中,由已知的磷酸化位点的肽组成阳性对照,进行与测试样品相同的实验操作。通过显示磷酸盐损失的MS/MS的峰图,来鉴定磷酸化位点。

 

客户提供

 

样品类型

溶液样品、凝胶样品或IP磁珠

蛋白信息

目的蛋白的氨基酸序列或登录号

蛋白质量

不少于20ug纯化的蛋白质或富含目标蛋白的蛋白混合物(如IP产物)

蛋白浓度

5-20mg/ml

缓冲液

请告知我们您的缓冲液信息

注意

不接受任何存在生物安全隐患的样品

 

如何订购?

 

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