卡梅德生物科技(天津)有限公司
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卡梅德生物科技（KMD BioscienceTM）能够为客户提供高质量的，基于M13噬菌体展示的驼源抗体筛选服务，包括双峰驼和单峰驼（羊驼）来源的纳米抗体噬菌体展示技术服务。我们的科学家拥有多年的重链抗体（Vhh抗体）文库展示构建，筛选经验，能够在较短的时间周期内获得高品质的纳米抗体。
驼源抗体文库制备-重链抗体背景
传统意义上血清抗体主要包括IgG1，IgG2，IgG3和IgG4 四种亚型,而驼源主要血清抗体包括IgG1，IgG2和IgG3三种类型，其中IgG1与传统抗体结构相似，含有2条重链和2条轻链；IgG2和IgG3缺少CH1和轻链结构域，因此也被称为重链抗体(heavy Chain Antibody, hcAb)，如图1所示：
图1 经典抗体与重链抗体模式结构
(a) 传统抗体 及其Fab/scFv抗体形式 (b) 重链抗体及其VHH抗体形式
重链抗体在羊驼和骆驼血清中的分步是不均衡的，骆驼血清抗体中重链抗体占比约为60-75%，羊驼血清抗体中重链抗体占比约为40-50%。这这种显著的差异导致了构建的骆驼VHH抗体文库具有先天的优势，如表1所示。驼源抗体文库主要是指利用驼源重链抗体的可变区，即VHH区域序列构建的VHH抗体文库，又叫纳米抗体文库。VHH抗体的特点是只含有重链抗体的抗原结合区，如图2所示，氨基酸长度约为110AA，SDS-PAGE显示分子量约为15kDa（远小于传统抗体150kDa的分子量），具有优秀的稳定性，能够抵抗极端的pH环境。 同时在VHH人源化改造方面，也具有良好的适应性，容易满足Car-T等免疫细胞的改造和分选实验要求。
图2 羊驼重链抗体与VHH抗体模式
骆驼与羊驼VHH抗体文库对比
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比较项目 |
骆驼VHH抗体文库 |
羊驼VHH抗体文库 |
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抗原耐受量 |
高，多种抗原混合，高剂量免疫 |
较高，多种抗原混合中等免疫剂量 |
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抗血清滴度 |
高 |
高 |
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中和抗体效价 |
高 |
较高 |
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抗体亲和力 |
更容易获得高亲和力抗体 |
能够获得高亲和力抗体 |
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抗原需求量 |
4-6mg，纯度>85% |
2-3mg，纯度>85% |
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采血量 |
一次可采血100ml |
一次20ml血液 |
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PBMC细胞量 |
高 |
一般 |
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有效库容 |
高，免疫库108-109 |
高，免疫库107-108 |
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免疫代价 |
较低 |
高 |
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小分子抗原反应性 |
高 |
一般 |
