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羊驼单克隆抗体制备服务

利用噬菌体抗体展示技术,卡梅德生物能够为客户提供优质的重组单克隆抗体制备服务,包括兔源,鼠源,驼源,羊源,鸡源及鲨鱼类重组单克隆抗体制备。我们的服务包括从抗原设计,合成与修饰,动物免疫,噬菌体文库构建与筛选到下游抗体修饰与应用鉴定。

重组单克隆抗体制备服务 — 羊驼单抗克隆抗体制备

羊驼抗体只具有重链不含轻链,因此被称为重链抗体(heavy Chain Antibody, hcAb,如图1中D所示,羊驼抗体缺少轻链,由4个HC和2个VH组成,其中VH区域又被称为纳米抗体或单域抗体(single domain antibody, sdAb)。独立的羊驼VH区域具有完整的抗原结合能力,同时不像人工改造的单链抗体片段(single chain Fv, scFv),容易聚集。和传统抗体相比,骆驼抗体具有极其稳定的性质,例如在60℃仍能保持活性,抵抗极端的pH环境。

图1 A,传统IgG;B,传统抗体Fab片段;C,传统抗体的单链Fv片段;D,重链抗体或驼类抗体;E,驼类抗体的VH区域或单域抗体(sdAb)

 

利用噬菌体抗体展示技术,卡梅德生物能够为客户在较短的时间内生产拥有高特异性、高活性和高亲和力单克隆抗体。采用噬菌体抗体展示技术制备单克隆抗体具有极大的优势,该技术不受物种来源的限制,同时利用该技术制备的杂交瘤以抗体基因的形式保存在噬粒载体上,结合不同蛋白表达策略,如原核蛋白表达,真核蛋白表达,可以实现多种规格的单克隆抗体生产,并获得高特异性和高亲和力的重组单抗。

目前我们成功建立了来自34只羊驼的天然噬菌体抗体展示文库,有效库容量达到1010,通过该文库的筛选,能够极大缩短羊驼单抗的制备周期。同时,采用不同的筛选策略,如抗原递减法,同时结合我司的蛋白重组表达平台,能够为客户提供高达~5g/L水平的重组抗体抗体表达发酵服务,在很大程度上提高了抗体批间一致性和稳定性。

 

羊驼单抗定制服务项目流程:

 

步骤

服务内容

交付材料

周期

半抗原改造

/

改造后的小分子衍生物LC-MS的鉴定结果

1-2

完全抗原制备

卵清蛋白

完全抗原SDS-PAGEUVMALDI-TOF鉴定结果

1-2

钥孔蓝蛋白

人血清白蛋白

球蛋白

噬菌体抗体库的制备

抗原乳化,免疫1-2只羊驼23

PCR结果,免疫检测结果(含ELISA的效价和特异性检测结果),实验记录

3-5个月

收集脾细胞(或者外周血淋巴细胞),可变区基因分离

噬粒构建,转染表达,文库构建

重组抗体表达

抗体筛选,构建表达质粒,真核或原核表达重组抗体

 

1-2个月