肿瘤的发生是一个多基因、多阶段的复杂过程，其中的致癌基因和抑癌基因发挥着不同的作用机制。现阶段的对肿瘤的发生机制还有很多的未解之谜，并且很多的研究无法探究发生的整体过程。因此小伙伴们的许多研究都需要借助永生化细胞的建立进行。

细胞永生化是指细胞在体外培养的过程中，由于自身基因变化或者是外界各种刺激条件，避免的正常传代细胞衰老死亡的过程，以至于可以长期传代培养、无限分裂增殖。

我们归纳总结了现阶段几种细胞永生化的机制:

1.放射因素

大致就是通过射线的方式辐射细胞，从而促使细胞染色体重组，抑癌基因表达被抑制。使细胞衰老程序无法稳定进行，达到无限增殖的目的。这种方法也是不常用的方式，概率的作用很大。并且耗费大量的细胞得不偿失。

2.端粒-端粒酶激活

端粒具有维持染色体稳定和位置稳定的作用，防止染色体消化。总之就是能防老的灵丹妙药，而端粒酶就是药引子了，能够催化端粒复制，增加端粒长度的逆转录酶。但是正常的原代细胞中端粒酶很少，hTERT基因作为端粒酶的催化亚基，当然有一定的联系。通过hTERT基因的表达实现永生化就成为了一种重要手段。这种方法是人们常用的手段，精准简便。

3.病毒侵染

病毒侵染的方法，改变正常基因，使细胞度过两个致死期，从而达到无限增殖。所使用的病毒最多的还是SV40病毒，还有EB病毒 HPV病毒等等。病毒的作用机理比较复杂，但最终目的都是导致抑癌基因表达受阻而实现的。这种方法也是常用的机制，考虑到成本的小伙伴可以采用。

4.原癌基因和抑癌基因

真核细胞里边都存在的有原癌基因和抑癌基因，c-myc是最早发现的原癌基因，转录翻译的蛋白可以间接的促进端粒酶mRNA快速高效表达，激活端粒酶的活性。反之抑癌基因的降表达也会出现类似的效果。

真核细胞里边都存在的有原癌基因和抑癌基因，c-myc是最早发现的原癌基因，转录翻译的蛋白可以间接的促进端粒酶mRNA快速高效表达，激活端粒酶的活性。反之抑癌基因的降表达也会出现类似的效果。

卡梅德生物细胞永生化的几种方法：

--猿猴病毒40 (SV40) 细胞永生化系统

--hTERT 细胞永生化系统

--MycT58A细胞永生系统

--RasV12细胞永生化系统