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卡梅德生物(KMD Bioscience)多年来致力于蛋白表达、制备及其相关领域的研究,我们的科学家能够为您提供全方位的蛋白相关问题的解决方案。蛋白互作研究过程中,常需要找到蛋白或酶的配体,因此迫切需要一种高通量筛选方案,可以满足广大科研用户的需求。卡梅德生物提供的噬菌体展示平台是一种超高通量的配体筛选方式,通过该技术平台可以构建多达1013/ml个经过噬菌体展示的多肽或抗体克隆,平均可以做到独立克隆数为109-1010/ml,经过后续多轮淘筛可以提供多达105有效多肽或抗体的序列,为后续酶底物,蛋白配体和高特异性抗体搜寻提供坚实的研究基础。同时,配合卡梅德生物的亲和力筛选平台,可以在短时间内(2-3天)获得不同的多肽或抗体与靶点蛋白目标的亲和力排序,甚至精准亲和力的测定都可以完成(亲和力测定服务,详情请查看亲和力测定服务。基于噬菌体平台,卡梅德生物可以为客户构建随机7肽文库,12肽文库,15肽文库等,能够充分满足客户的不同需求。
卡梅德生物致力于为客户提供多肽文库构建的优质服务。
图1 肽库构建原理及流程(以抗体库展示为例)
T7噬菌体:
T7噬菌体是Podoviridae家族的一种二十面体病毒,具有线性双股(ds)DNA基因组。与T4类似,噬菌体T7拥有一个头和尾的结构。二十面体头部,即T7保存其dsDNA基因组的地方,由415个拷贝的衣壳蛋白gp10组成,在表面排列为60个六聚体,在顶点排列为11个五聚体。主要的衣壳蛋白gp10有两种异构体,gp10A和gp10B,比例为9比1,是由341个氨基酸的自然翻译框架转移造成的。
小蛋白gp10B的产生是由于基因末端的框架转换,使帽状蛋白多出52个残基。融合蛋白显示在蛋白gp10B的C端,多出的52个残基。T7噬菌体颗粒在各种极端条件下表现出高稳定性,包括高温和低pH值,这有利于有效地进行高通量亲和洗脱。最近,T7噬菌体展示系统的应用在揭示分子相互作用的机制方面发挥了作用,特别是在抗原发现、疫苗开发、蛋白质相互作用以及癌症诊断和治疗领域。
图2 噬菌体展示肽库
卡梅德生物提供的肽库构建流程:
流程 |
服务项目 |
核苷酸序列合成 |
随机合成客户指定长度的核苷酸序列 |
聚合和酶切 |
合成的DNA序列进行聚合和酶切 |
电转化文库制备 |
制备 ER2738宿主菌,然后用构建良好的重组质粒转化大肠杆菌 |
肽库容量和多样性检测 |
通过菌落计数检测抗体库容量,以及通过测序检测抗体库多样性 |
噬菌体展示多肽文库制备 |
通过感染 T7噬菌体包装肽库 |
交付 |
冰袋邮寄 |
卡梅德生物提供的肽库构建服务:
卡梅德生物凭借丰富的经验以及完善的噬菌体展示技术平台,可以为客户提供多种不同长度,不同特性的肽库定制服务,以满足客户的需求。我们提供使用T7噬菌体系统的定制肽库构建和筛选(卡梅德生物提供肽库或抗体库筛选服务)项目的特色服务。
服务优势:
--卡梅德生物构建的多肽文库可高通量生产
--广泛地应用于多肽药物的研发,准确的定位抗原决定簇
--可溶抗原的快速制备能力:结合公司现有的重组蛋白表达体系,能够在短时间内制备出高纯度、高生物学活性的可溶抗原蛋白,用以支持噬菌体抗体的免疫及筛选工作
如何订购?
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