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SPR亲和力测定服务

卡梅德生物基于Biacore平台为客户提供准确、快速的亲和力测定服务表面等离子体共振 (SPR)亲和力测定是一种基于光学的无标记检测技术,用于实时测两个或多个分子之间的分子互作SPR亲和力测定平台吞吐量、灵活性和灵敏度使研究人员有可能在任何结合研究包括:抗原抗体亲和力检测,蛋白与小分子多肽亲和力检测,蛋白与小分子药物的亲和力检测。可以研究范围广泛的分子从离子、片段和小分子到蛋白质和病毒。 卡梅德生物的技术专家基于SPR亲和力测定技术,在项目开始前为客户提供精准、有效的技术咨询服务,为客户提供1-2周的快速亲和力检测周期,为客户提供精确、有效的亲和力测定数据为客户的实验项目提供强有力的保障。

 

表面离子共振SPR

 

表面等离子体共振 (SPR)亲和力测定是一种基于光学的无标记检测技术,用于实时测两个或多个分子之间的分子互作SPR亲和力测定具有高通量、高灵活性、高灵敏度的特点,可以用于早期的药物研发以及临床前药物筛选。比如:筛选小分子药物或多肽(酶或抗体等)具有强大的优势能够快速、精准地筛选出候选药物分子为后续研究节省成本。

SPR亲和力检测是一种通过传感器芯片跟踪信号变化来检测分子相互作用的方法。SPR信号通过折射率变化呈现,它指的是响应单位 (RU) 大约相当于1pg/mm2的蛋白质表面浓度。在两个分子之间的相互作用过程中,随时间绘制SPR信号会产生传感图,该图可以实时可视(图 1)。一般结合反应包括三个阶段:结合、平衡和解离;将这些传感图数据与数学模型拟合,科学家们可以计算关联 (Ka) 和解离 (Kd) 速率常数,并最终确定结合亲和力(KD)。与基于平衡点测量抗体结合亲和力的等温量热法 (ITC) 不同,SPR可以获得完整的动力学参数来评估结合和解离的所有影响以及抗体亲和力。

在抗体亲和力测量中,待分析的抗体首先被固定在传感器芯片表面的高亲和力抗IgG 抗体捕获。然后将一系列浓度的抗原依次注射到整个表面。根据传感图曲线,人们可以根据动力学参数对抗体进行排序,并选择具最佳特性的单克隆抗体。与紧密结合抗体的发现相比,特定区域(表位)的鉴定在药物发现中更有前景,因为通过标准的蛋白工程方法可以使结合亲和力成熟因此,基于涉及两种结合反应的二价分析物模型,我们能够提供分析来鉴定与两种不同抗原表位结合的抗体。首先将通用抗体(如兔抗小鼠免疫球蛋白)共价连接到芯片表面,然后第一抗体被先前连接的通用抗体捕获。不饱和位点被封闭后,注射的抗原将与第一抗体结合,形成Ab-Ag复合物。随后施用于评估结合亲和力的第二单克隆抗体,如果第二抗体结合不同的单独表位,将观察到特有的传感图曲线。

 

1卡梅德生物提供的表面离子共振法原理图

 

应用范围:

 

我们提供通过SPR分析研究的生物分子相互作用的服务。

通过SPR研究各种生物实体,包括小分子 (<100 Da)、蛋白质、核酸、脂质、细菌、病毒和全细胞。大多数已发表的SPR研究涉及蛋白质-蛋白质相互作用,其中抗体-抗原相互作用代表了一个主要方向。我们提供高灵敏度的仪器和精确的实验方案,帮助客户进行小分子、脂质和核酸的研究。蛋白质与较大实体(如全细胞和一些细菌和病毒)的相互作用受到渐逝波指数衰减的限制。在实践中,可以有效地研究这些大分子,但获得的信息可能仅限于定性或半定量(例如,相对排序)数据。

 

 检测类型

 

有几种类型的 SPR亲和力检测是常用的,包括结合特异性、浓度分析、动力学和亲和力分析以及热力学。每种检测类型都会生成有助于分析生物分子的独特信息。

SPR亲和力检测也适用于定性研究以确认相互作用的特异性。可以监测许多连续的结合事件,因为每个单独的事件都会导致传感器芯片表面的质量增加,并且结合过程的所有阶段都受到监测。例子包括表位作图、抗体同种型和免疫原性测量。

大多数用于定量蛋白质的化学和光谱方法 (1) 测量总蛋白质含量,(2) 不能区分活性分子和非活性分子,以及不能与未纯化的样品结合使用。由于SPR是一种非侵入性方法(没有光穿透样品),它可以测量来自复杂基质(例如食品、血清或血浆以及细胞提取物)的少量分析物分子。用于测量浓度的直接或间接(抑制或竞争)是可能的。SPR生物传感器特别适用于通过实时测量结合相互作用来测量动力学结合和解离速率常数。

2 卡梅德生物SPR传感器表面吸附牛血清蛋白

 

服务范围

 

卡梅德生物提供基于SPR亲和力检测技术的无标签分子互作研究:包括蛋白质-蛋白质的亲和力检测;抗体抗原亲和力检测;蛋白质与小分子药物亲和力检测;蛋白质-DNA亲和力检测等以及根据客户的需要,含受体的低分子量化合物和许多其他化合物的亲和力检测以及高通量亲和力排序服务。

 

样品要求

 

客户提供

要求

客户可提供抗体,蛋白,多肽,化合物小分子等样品

1)  缓冲液:PBS, HEPPS等不含有机试剂,不含Tris

2)  抗原:蛋白(多肽)>2mg,浓度>0.5mg/ml

3)  蛋白样品(含抗体):>200ug,浓度>0.5mg/ml

4)  多肽样品:>200ug,浓度>1mg/ml

5)  化合物小分子:>300ug,浓度>1mg/ml

 

服务优势

 

--技术专家直接服务,满足客户需求;

--高准确度分析仪器,经验丰富的操作以及严格的质量管理,保证结果精准可靠;

--检测效率高,无需标记,可实现高通量检测,检测过程实时监控;

--方法设计更加便捷,简单灵活易操作;

--仪器检测灵敏度更高,样品消耗量更低;

--抗干扰能力强:检测不受温度、缓冲液折射率等外界环境影响;

--应用范围广泛:可用于蛋白、核酸、多肽、纳米材料等分子互作分析;

--提供真正的一站式服务:提供从亲和力测定服务,到分子互作研究的一体化解决方案

 

服务流程:

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-022-8216-4980/156-0119-0182或发送邮件至info@kmdbioscience.com