卡梅德生物科技(天津)有限公司
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重组单克隆抗体制备服务 — 兔单抗克隆抗体制备
兔抗体噬菌体展示库是兔源多克隆抗体和单克隆抗的优质来源，其最大的特点是可以在短时间内生产拥有高特异性、高活性和高亲和力单克隆抗体。与杂交瘤技术相比，利用噬菌体文库技术制备的杂交瘤可以抗体基因的形式保存在噬粒载体上，结合不同蛋白表达系统的优势，如利用无细胞表达体系，可以实现无动物源生产并获得高特异性和高亲和力的重组单抗。兔单克隆抗体识别啮齿类和人体抗原共同的抗原决定簇能力方面要远远好于鼠类单克隆抗体，这点也是由于兔和啮齿类动物中常用的大鼠、小鼠进化关系较远，啮齿类单克隆抗体对啮齿类和人体抗原共同的抗原决定簇不起作用，而兔抗体却可以很好的辨识啮齿类和人体抗原共同抗原决定簇，克服了抗体生产中这一障碍。
在噬菌体技术制备重组单抗过程中，我们通过将兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进入人源抗体骨架单价蛋白构建嵌合抗体库，以此避免兔Fab抗体片段对大肠杆菌的毒性。随后将筛选到的高特异性和高亲和力的兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进带有兔子抗体骨架蛋白的质粒载体，同时联合我们的蛋白重组表达平台进行瞬时表达（产量可达~5g/L）。
兔单抗制备服务流程：
项目流程：
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步骤 |
服务内容 |
交付材料 |
周期 |
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半抗原改造 |
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改造后的小分子衍生物LC-MS的鉴定结果 |
1-2周 |
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完全抗原制备 |
卵清蛋白 |
完全抗原SDS-PAGE、UV或MALDI-TOF鉴定结果 |
1-2周 |
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钥孔蓝蛋白 |
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人血清白蛋白 |
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人-γ球蛋白 |
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噬菌体抗体库的制备 |
抗原乳化，免疫2-3只兔子2至3次 |
PCR结果，免疫检测结果（含ELISA的效价和特异性检测结果），实验记录 |
3-5个月 |
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收集脾细胞（或者外周血淋巴细胞），可变区基因分离 |
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噬粒构建，转染表达，文库构建 |
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抗体筛选，再克隆，抗体表达 |
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腹水制备，抗体纯化 |
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