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腺病毒(ADV)为无包膜的二十面体的DNA病毒,一般通过呼吸道传染及流行。ADV是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈20面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含30-47kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。目前已经发现了100余个血清型,其中人腺病毒有52种,分为A、B、C、D、E和F六个亚群(subgroup)。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群,在DNA序列上有95%的同源性腺病毒引起的急性传染病,易侵犯呼吸道及消化道黏膜、眼结膜、泌尿道和淋巴结。主要表现为急性上呼吸道感染。
卡梅德生物(KMD Bioscience)是一家从事体外诊断核心原料研发、生产的高科技生物企业。以客户需求为主旨,为体外诊断试剂生产商提供体外诊断用抗体、抗原、酶、纳米材料等原材料。拥有免疫层析、胶乳比浊、化学发光、分子诊断等多个成熟技术平台。主要产品为体外诊断用抗原(天然抗原、基因工程重组抗原)、抗体(单抗、多抗)、荧光微球等,涵盖心血管、肾脏类、激素类、糖尿病、传染病、自身免疫疾病等多个领域。
ADV的构成
腺病毒呈无囊膜的球形结构,其病毒粒子在感染的细胞核内常呈晶格状排列,每个病毒颗粒包含一个36 kb的线性双链DNA,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-peat, ITR),ITR的内侧为病毒包装信号,是病毒包装所需要的顺式作用元件。基因组包含早期表达的与腺病毒复制相关的E1~E4基因和晚期表达的与腺病毒颗粒组装相关的L1~L5基因。线状双股DNA与核心蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯,被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称,由252个直径8~10 nm的壳粒组成,壳粒排列在三角形的面上,每边6个,其中240个为六邻体(非顶点壳粒),另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体,三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底,塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4,基底包含两个区域P1、P2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血清型的标准,它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分,是病毒体对免疫选择压力最敏感的部位。每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77. 5 nm的纤维突起,这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出,纤维顶端形成头节区,纤突有血清特异性,且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决定位点。
图1 AVD2分子结构示意图
ADV感染细胞的过程
腺病毒的生活周期可以分为两个阶段。包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞,将基因组释放到宿主细胞核中,以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段,细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒。腺病毒感染细胞是通过纤突蛋白与细胞表面CAR结合。腺病毒粘附后,五邻体蛋白上的精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸(RGD)与细胞表面的整合素αvβ3和αvβ5结合并相互作用使腺病毒进入细胞。
卡梅德生物(KMD Bioscience)具备优异的体外诊断试剂开发平台,所有原料均通过多个应用平台及大量的临床样本反复验证,经过严格的生产工艺控制,能持续稳定的为广大IVD客户提供优质原料。我们的抗原原料大多是采用哺乳动物表达系统制备的,结构与活性更接近天然抗原。每一个抗原的生产都是经过严谨的方案设计、严格的性能评估,具备有优异的稳定性、特异性等。而且,我们的抗原原料可以应用于标准品、校准品、质控品的研发与作为免疫原。