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噬菌体展示技术服务

噬菌体展示技术为全人源治疗性抗体的研发提供了基础,拓展了定向进化技术在抗体多肽改造筛选方面的应用,对抗体药物的研制具有重要意义。卡梅德生物(KMD Bioscience)在抗体领域研究多年,我们构建的噬菌体展示技术服务涵盖了多种文库类型,能为客户提供基于只有噬菌体抗体文库平台技术制备的多物种单克隆抗体制备服务,如人,鼠,兔,鸡,羊,鹅,猪,牛,马,驴,骆驼,羊驼,鲨鱼等物种来源的单克隆抗体,可根据客户的需求提供定制服务,并提供灵活有效的筛选服务。

此外,卡梅德生物拥有丰富的抗体工程构造经验,能够进行立体化的抗体上下游服务,包括抗体人源化服务人源scFV抗体库构建服务人源Fab抗体文库构建服务人源抗体噬菌体文库制备服务抗体亲和力成熟服务驼源纳米抗体文库构建与筛选等,满足不同客户的科研要求。

 

噬菌体抗体文库技术平台:

 

噬菌体展示技术(phage displayed technology,PDT)是将外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合,展示在噬菌体表面并保持特定的空间构象,利用特异性亲和作用以筛选特异性蛋白或多肽的一项新技术。1985年Smith,G.P提出将外源基因插入改建过的噬菌体外壳蛋白基因,表达含有外源蛋白或多肽的融合蛋白,这种带有融合蛋白的噬菌体称为融合噬菌体。通过吸附-洗脱-扩增的重复过程,将含有能与靶蛋白特异结合的外源蛋白的噬菌体从表达各种外源蛋白的噬菌体库中筛选出来,然后进行富集、扩增及基因序列测定,推断外源蛋白的氨基酸组成。该技术将基因型与表型、分子结合活性与噬菌体的可扩增性结合在一起,是一种筛选新技术。目前已成功应用于抗原表位分析,单抗筛选,蛋白质功能拮抗多肽或模拟多肽的确定等,具有筛选容量大、可发酵大量生产、方法简单等优点。其在疫苗设计等方面发挥重要作用。

 

图1 噬菌体展示技术示意图

 

噬菌体展示系统:

 

M13单链丝状噬菌体展示系统是目前应用较广泛的文库展示系统,通过将蛋白、抗体或多肽与噬菌体pIII蛋白融合表达,使之参与噬菌体组装,并展示在噬菌体表面,形成噬菌体展示文库。

卡梅德生物利用M13丝状噬菌体壳蛋白pIII和PVIII展示技术,能够为客户构建不同物种的天然文库或者免疫的纳米抗体展示文库,最高库容量可达1011

 

卡梅德生物的噬菌体抗体展示技术平台服务优势:

 

--可溶抗原的快速制备能力:结合公司现有的重组蛋白表达体系,能够在短时间内制备出高纯度、高生物学活性的可溶抗原蛋白,用以支持噬菌体抗体的免疫及筛选工作

--成熟稳定的免疫文库构建技术:目前我们获得的噬菌体一级免疫文库的库容可达108-109,其序列丰度>99%,保证直接筛选获得的抗体亲和力达到nM甚至pM级别

--快速可靠的候选抗体筛选及初步鉴定技术:根据不同的抗体药功能需求,开发了多种筛选体系,包括直接筛选法、竞争法、负筛选法、细胞筛选法等

 

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