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卡梅德生物(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究。我们拥有经验丰富的抗体制备技术人员,积累了充足的抗体制备经验和专业技术,配合成熟的抗体制备产业线,能够为客户提供不同物种的单克隆抗体定制服务。基于抗体平台、蛋白平台等完善的平台体系建设,我们涵盖了抗体生产的上下游服务,能够实现从抗体制备,到抗体纯化,抗体测序,抗体亲和力成熟等一站式技术服务。 |
羊是一种大型宿主,通常情况下,动物个体越大,可获得超高亲和力的抗体的可能性越大。卡梅德生物可以为客户提供高品质的羊单克隆抗体制备服务,通过噬菌体展示技术筛选得到高亲和力的抗体,完善的蛋白表达平台可以高水平表达重组抗体,提高了抗体工程改造,性能优化的可能。我们在整个项目过程中会保持与客户的沟通,项目进展透明化,保证交付满足需求的抗体纯度和质量。
鼠类单克隆抗体亲和力一般在10-9 M,通过基因工程手段,目前已经能够制备不同物种的单克隆抗体,利用异源杂交瘤细胞融合技术制备的鼠/羊杂交瘤能够分泌抗体亲和力达到10-13 M。该技术主要缺点在于异源杂交瘤在体外培养过程中容易丢失抗体的分泌能力,同时传代次数被严重限制,生产同等规模的羊单抗,成本与采用重组技术制备的杂交瘤要高出3-4倍。
卡梅德生物建立了完善的噬菌体抗体展示技术平台,能够在较短的周期内为客户生产具有高特异性、高活性的羊单克隆抗体。利用该技术平台,羊抗体基因被连接到噬粒载体上,再结合不同蛋白表达技术,如原核蛋白表达,真核蛋白表达,可以实现多种规模的羊单克隆抗体生产。目前,我们能够为客户提供达-5g/L水平的重组抗体表达发酵服务,提高了抗体批间一致性和稳定性。
制备流程:
服务内容:
步骤 |
服务内容 |
交付材料 |
周期 |
半抗原改造 |
小分子改造 |
* 改造后的小分子衍生物LC-MS的鉴定结果 |
3-4周 |
完全抗原制备 |
卵清蛋白 |
* 完全抗原SDS-PAGE、UV或MALDI-TOF鉴定结果 |
1周 |
钥孔蓝蛋白 |
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人血清白蛋白 |
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人-γ球蛋白 |
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噬菌体抗体库的制备 |
抗原乳化,免疫1只羊5次 |
* PCR结果,免疫测定结果(含ELISA的效价和特异性测定结果),实验记录 |
16-18周 |
收集脾细胞(或者外周血淋巴细胞),可变区基因分离 |
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噬粒构建,转染表达,文库构建 |
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文库筛选(固相筛选、液相筛选等) |
* 抗体序列,文库筛选结果,ELISA阳性克隆鉴定结果,实验报告 |
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重组抗体表达 |
抗体筛选,构建表达质粒,真核或原核表达重组抗体 |
* 重组抗体,表达质粒,克隆菌株,实验报告 |
1-2个月 |
样品要求:
客户提供 |
要求 |
重组蛋白 |
* ≥3.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供15mg左右重组蛋白 |
多肽与小分子 |
* 裸肽≥15mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估 |
服务优势:
--得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
--丰富的经验积累,成熟的技术路线,产品质量稳定可靠、灵敏度高
--严格的质控体系,标准化的操作流程,保证抗体品质
--拥有完善的蛋白平台,多种表达系统可供选择
--提供单克隆抗体大规模生产服务,满足工业化生产需求
--提供从抗原制备到噬菌体文库构建,抗体筛选等一体化服务
--提供抗体标记、抗体对筛选、试剂盒开发、免疫学检测等增值服务
不同物种的单克隆抗体比较:
类型 |
特点 |
* 制备手段和技术成熟,是常用的模式物种 * 抗原需求量少,成本低 * 批次间差异小,可快速、连续生产 |
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* 制备体系成熟,制备成本相对低廉 * 特异性强、与鼠类相比具有更高的亲和力和活性 * 更广泛的抗原适应范围 |
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* 为重链抗体,拥有广泛的抗原决定簇的结合功能 * 因结构中的二硫键存在,稳定性更强 * 更易进行人源化改造 |
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* 体型较大,适合较大量的血清或抗体制备 * 抗体高效价,稳定性高,产品商业化较好,良好的适用性 * 应用领域广泛,涵盖检测治疗等多个领域 |
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