卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物致力于纳米抗体库构建与纳米抗体文库筛选服务已有9年多的时间，并拥有一支经验丰富的技术团队。基于我公司成熟的抗体发现服务平台，每年都有数百个羊驼纳米抗体文库构建服务成功交付。卡梅德生物建立了一个完善的、成熟的纳米抗体展示技术服务平台。基于噬菌体展示技术，卡梅德生物可以提供包括抗原设计、羊驼免疫、羊驼纳米抗体文库构建与筛选、活性功能验证等主要实验环节，并为全球的科学家提供高特异性和高亲和力的羊驼纳米抗体文库构建服务。
羊驼纳米抗体文库构建服务背景：
羊驼是骆驼科的成员，包括美洲驼（Llama）以及我们熟悉的羊驼（Alpaca）。除常规IgG外，驼科动物还产生一种功能性单链抗体，或称为单域抗体，该抗体能够与抗原结合，有时称为VHH抗体。这些抗体仅由重链组成，缺乏轻链和功能性CH1和CH4结构域。这些所谓的重链抗体正被用于开发单域抗体。这些抗体的单结构域性质提供了独特的优势，使其在生物技术应用中脱颖而出。
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图1羊驼抗体肽结构域示意图
羊驼VHH抗体（单域抗体）的优点：（1）在高温和pH下的稳定性；（2） VHH可以识别通常不被常规抗体识别的抗原位点；（3）它们的小分子片段有助于快速组织渗透和标记应用，包括跨越血脑屏障；（4）用于大规模生产节约成本的替代品。
卡梅德生物使用M13噬菌体的pIII蛋白进行VHH抗体（纳米抗体）的表面展示。我们的科学家构建了带有Flag和6×His标签双标签的噬菌体载体，并制备了具有108转染效率的TG1和XL1 Blue宿主细胞，经过2-3次转染和扩增，可以为客户提供高质量的羊驼纳米抗体展示文库，其足够的库容量为108-109，包装容量为1013-1016/ml。通过抗原限制压力进行多轮纳米抗体文库筛选，可获得多达20-30株高亲和力噬菌体菌株。最后通过简单的IPTG诱导，可以在1-2周内获得大量抗体表达产物，以满足客户的研究需求，例如FACS（流式检测）和细胞活性测试。
羊驼纳米抗体库构建流程：
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羊驼纳米抗体库构建服务内容：
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步骤 |
服务内容 |
周期 |
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羊驼免疫 |
* 一只健康的成年羊驼（28-36月大）免疫5-7次 * ELISA效价测定 * 抗血清采集 |
8-10周 |
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cDNA制备（客户可以提供细胞） |
* 总RNA提取 * 高保真RT-PCR制备cDNA |
1个工作日 |
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VHH纳米抗体库的构建 |
* 引物设计与合成 * 以cDNA为模板，PCR扩增重链抗体基因可变区 * 噬粒构建与转化：酶切、连接噬菌粒载体，电击转化TG1宿主菌，构建抗体库 * 鉴定：随机挑选20-50个克隆，PCR鉴定、测序、分析抗体序列 |
3-4周 |
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VHH纳米抗体文库筛选（3轮） |
* 抗原极限施压法进行3轮筛选 * 鉴定：随机挑选96个克隆，ELISA效价测定 * 10-15个阳性克隆表达制备VHH抗体上清 |
4-5周 |
交付：
--羊驼VHH纳米抗体库2ml，>1⨯1013/ml噬菌体颗粒，有效库容量>108
--表达10-15个阳性克隆以制备VHH抗体上清液
--实验报告：实验步骤和序列测定信息和比对结果
--原始数据：可根据客户要求提供完整实验记录原始数据
服务优势：
--可以根据客户需求提供驼源免疫库构建服务和天然羊驼抗体库筛选服务
--约16-19周可获得周期短、质量高的纳米抗体文库和单克隆抗体细胞系
--高库容量：足够的库容量108-109/免疫库
--高亲和力抗体构建
--个性化方案分析和定制
--完整的文件追溯提和QC质量控制文件
如何订购？
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