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TA克隆就是把PCR片段与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。该方法利用Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3' 端加上一个非模板依赖性碱基“A”。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3'端自动添加一个3'-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3'-T突出末端的DNA片段才能通过T/A配对进行连接。通过PCR的方法扩增目的基因片段的过程中,由于往往不清楚目的基因的DNA序列,获得的目的片段通常需要通过TA克隆的方法,重组到T-载体中,通过序列测定清楚DNA序列。
cDNA末端快速扩增技术(RACE),是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。是基于PCR技术由已知的一段cDNA片段,利用锚式PCR,快速扩增cDNA末端从而获得已知mRNA内一段小序列与3'或5'的cDNA序列技术。卡梅德生物(KMD Bioscience)从事分子生物学研究多年,我们的分子生物学平台拥有高学历和分子生物学操作经验丰富的技术人员,可为您提供专业的分子生物学实验服务。卡梅德生物的科学家可根据客户的具体需求提供TA克隆服务及RACE PCR服务,以满足客户的需求。
基因克隆服务内容:
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服务内容 |
周期(工作日) |
TA克隆 |
片段长度<1000bp |
5-8日 |
3’RACE |
片段长度<1000bp |
5-8周 |
5’RACE |
片段长度<1000bp |
5-8周 |
备注:片段超出1kb的克隆服务,具体情况还需与我们专业的技术同事联系。
服务优势:
--快速的实验周期,节省客户成本
--客户设计,我们构建:将基因克隆到选择的载体的任意位置中
--成熟的平台,可接受大量样本同时合成检测
--质量保证:使用限制酶消化和测序验证序列,所有交付的质粒都经过严格的QC序列验证
--可提供从RNA提取到同源克隆以及后续分子生物学实验的一站式服务
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