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DNA甲基化是表观遗传学的热点研究领域,在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及人类肿瘤发生中起着重要作用。获得全基因组范围内所有C位点的甲基化水平数据,对于表观遗传学的时空特异性研究具有重要意义。
卡梅德生物以高通量测序平台为基础,能够为用户提供DNA甲基化测序服务。我们拥有经验丰富的实验操作人员,能够帮助客户快速地获取全基因组范围内的DNA甲基化图谱,配合完善的生信分析方法,可提供详细的测序数据和完整的实验报告,根据用户不同的研究需求,能够针对性地挖掘提炼结果数据。
DNA甲基化实验原理:
DNA甲基化是较早发现的基因表观修饰方式之一,真核生物中的甲基化仅发生于胞嘧啶,即在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶转变为5’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常抑制基因表达,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。这种DNA修饰方式是不改变基因序列前提下实现对基因表达的调控。
图1 DNA甲基化
服务内容:
脊椎动物DNA的甲基化状态与生长发育调控密切相关,例如在肿瘤发生时,抑癌基因CpG岛以外的CpG序列非甲基化程度增加,CpG岛中的CpG则呈高度甲基化状态,导致抑癌基因表达的下降。为了确定DNA甲基化位点,我们能够为您提供三种解决方案:
项目 |
内容 |
亚硫酸氢盐电泳法 |
* 基因组DNA经亚硫酸氢盐处理后,未甲基化胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U),甲基化胞嘧啶不发生改变;设计不同的引物分别针对甲基化和非甲基化DNA序列,通过电泳检测PCR扩增产物进行甲基化位点鉴别 |
亚硫酸氢盐测序法 |
* 基因组DNA经亚硫酸氢盐处理后,未甲基化胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U),甲基化胞嘧啶不发生改变;设计不同的引物分别针对甲基化和非甲基化DNA序列,通过测序检测PCR扩增产物进行甲基化位点鉴定 |
高分辨率熔解曲线法 — 实时RT-PCR |
* 设计一对针对亚硫酸氢盐处理后DNA双链的引物,若位于引物对中间DNA片段存在甲基化位点,由于经过亚硫酸氢盐处理后未甲基化胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U),导致样品中GC含量发生改变,从而导致熔解温度的变化 |
服务优势:
--严格的质控体系:在每个关键步骤都有质控,评估每个步骤的质量,保证实验能够顺利开展
--技术娴熟的实验操作人员,优化的文库制备流程,保证测序结果准确可靠
--完整的信息分析,提供详细的项目报告,能够进行深入数据分析
--具有成熟的分子生物学平台,免疫检测平台,能够提供真正的一站式服务体验,节省客户宝贵时间
如何订购?
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