卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD Bioscience）多年来致力于建立完善的细胞培养平台，我们能够提供给客户多种细胞学基础实验。依托于优越的技术设备和完备的平台，能够为客户提供优质的细胞凋亡检测服务。此外，我们的实验室拥有先进的免疫荧光显微镜和流式细胞仪等系统，能为客户提供高质量的成像技术，为您的科研结果增色。根据客户的实际要求，卡梅德生物能够建立一套完整的实验方案，提供从细胞处理与制片，荧光显微镜观测和拍照等一站式实验服务，提升客户体验。
细胞凋亡（Apoptosis）是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。作为细胞的一种基本生物学现象，细胞凋亡是机体为更好地适应生存环境，而主动争取的一种死亡过程，是一个高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，一般过程包括4个阶段，即：诱导启动、细胞内调控、实施和凋亡细胞的吞噬搬运。卡梅德生物所提供的细胞凋亡检测服务，可用于检测不同类型、不同时期细胞凋亡状况及分析凋亡细胞比例。针对凋亡时期不同，检测的方法有所不同。
卡梅德生物提供的凋亡检测以“PI和Annexin-V双标”方法为主。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与磷脂酰丝氨酸（Phosphatidyl serine，PS）高亲和力特异性结合，在正常细胞中，PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的PS由脂膜内侧翻向外侧，因此Annexin V成为了检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。我们将Annexin V 进行荧光素标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将采用Annexin V-PI双标技术，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。同时，依托自身的免疫荧光成像平台，卡梅德生物能为客户提供高质量的图片数据。
细胞凋亡检测服务 — Annexin V /PI双染色法：
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项目 |
细胞凋亡检测服务 |
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实验原理 |
* 在细胞凋亡早期，位于细胞膜内侧的PS迁移至细胞膜外侧。Annexin V是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，它和PS具有高度的结合力。因此，Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外侧的PS。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V，将Annexin V标记上荧光素（如异硫氰酸荧光素FITC），用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。而PI染料能够与细胞内的DNA结合，区分坏死细胞和活细胞。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整，PI染料无法自由通过细胞膜进入细胞内与DNA结合，所以PI染料无法标记凋亡细胞和活细胞，而PI染料却能够通过坏死细胞的细胞膜与细胞内的DNA结合，坏死细胞内PI染料被488nm激光激发后会发射红荧光，被相应通道接收。所以Annexin V和PI同时使用，可以区分活细胞、早期凋亡细胞和坏死细胞。 |
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应用 |
细胞凋亡检测可应用于： * 肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究 * 临床诊疗，新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗 * 对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价 |
细胞凋亡检测服务主要实验流程：
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步骤 |
周期 |
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材料培养 |
1周 |
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药物处理 |
1-2周 |
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材料染色 |
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荧光成像或流式细胞检测 |
服务优势：
--保证细胞活力，制作高质量的细胞爬片
--熟练的实验操作水平和完善的实验流程，对细胞研究具有丰富的知识储备，能够保证检测结果客观准确
--提供详细完整的实验报告，包含实验原始结果，每一项实验参数，可直接用于论文的撰写
--完备的仪器平台：拥有多类型显微镜和流式细胞仪等重要仪器，具有高分辨率等特点，节约珍贵样本的同时即可获得详尽的数据
--提供细胞培养、细胞染色和图片拍照等一站式技术服务
实验案例：
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