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荧光原位杂交服务

卡梅德生物(KMD Bioscience)多年来致力于细胞生物学技术研究,拥有经验丰富科研专家团队、实验技能精湛的实验团队、完善的细胞培养平台以及完备的实验仪器和实验条件,积累了丰富的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术服务经验,搭建了完备的FISH技术服务平台,我们能够提供包括从探针设计、样本处理、杂交检测、基因表达研究到数据分析等一站式FISH技术服务,实现了检测程序的规范化和标准化,提高了实验结果的准确性,降低了假阳性和假阴性,保证为客户提供高质量的FISH服务。我们的荧光试剂和探针经济安全,短时间内即可完成所需实验,可以帮助客户减少实验室FISH操作的复杂耗时过程,同时降低了实验成本,节约宝贵样本,为客户的科研工作保驾护航。

FISH是一种非放射性分子细胞遗传学技术。该技术通过荧光标记的原位杂交方法,使荧光探针与染色体的靶序列特异性结合,并且在结合部分显示出高度的序列互补性,结合的部分通常使用荧光显微镜观察。可用于核型分析、细胞基因分型、癌症诊断、物种鉴定和基因表达分析的强大工具,用于显示细胞内的DNA或定位RNA。FISH为研究人员提供了一种新的用于可视化或绘制单个细胞中的遗传物质(包括特定基因或基因的一部分)的方法,是了解各种染色体异常和其他基因突变的重要工具。FISH操作灵活、安全、检测结果准确,能够对各种种属的样本(如植物组织、动物组织等)进行检测,特异性较高,是一种非常通用的程序。目前FISH已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析及数目异常分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学、微生物分析等众多领域。

 

实验原理

 

原位杂交(in situ hybridization)是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(放射性同位素、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位。

荧光原位杂是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种原位杂交方法。因为不需要放射性同位素标记,因此经济安全;还可以通过不同标记的探针,在同一个样品中同时检测多种序列。

荧光原位杂交探针的荧光标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记DNA探针,杂交之后用荧光素亲和素或者链霉亲和素进行检测,同时还可以利用亲和素-生物素-荧光素复合物,将荧光信号进行放大;直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸或磷酸戊糖骨架共价结合,或在缺口平移法标记探针时将荧光素核苷三磷酸掺入。直接标记法检测步骤简单,但由于不能进行信号放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。

FISH具有快速灵敏、特异性好的特点,可同时分析分裂期和间期的多个细胞,并进行定量;可以检测隐匿或微小的染色体畸变以及复杂核型;还可以使用多种荧光标记,显示DNA片段及基因之间的相对位置与方向,空间定位精确。

 

图1 FISH实验在细胞核中定位基因的原理示意图

 

服务范围

 

卡梅德生物可提供的FISH服务涵盖:人源、动物、植物、微生物等研究领域。针对不同的客户需求,我们的技术专家将提供专业的一对一的定制化方案以及不同种属样本的检测服务,为客户的项目研究提供有力的支持。比如:微生物FISH检测服务,即对微生物的rRNA进行检测和鉴定,原位检测、识别和选择特定的细菌和古细菌群。

 

 

服务流程:

  

 

客户提供:

 

--待测样本的相应信息

--待测目的基因相应信息或待测目的基因序列

--样本量信息

--检测要求

卡梅德生物的技术专家提供从探针设计、染色体/细胞/细菌制备/培养到结果呈现的全套定制荧光原位杂交(FISH)服务。详情请填写意向调研表或联系我们的工作人员。

 

卡梅德生物的交付内容:

 

--剩余的探针、切片以及样品

--原始杂交显色成像照片

--详细的实验报告(包含完整的实验流程及结果分析)

 

服务优势:

 

--可提供高特异性探针设计服务

--服务周期短(1-2周),定位准确,可在短时间内得到结果

--可检测样品范围广,涵盖人源、动物、植物、微生物等研究领域

--根据客户需求成像

--我们可以同时在一个核中最多显示3种颜色(红绿蓝)同时检测多种序列

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-400-621-6806或发送邮件至info@kmdbioscience.com