卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD Bioscience）从事微生物基因编辑多年，已拥有了完善的基因编辑技术平台，我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员，有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制，提供多种微生物的编辑服务，以满足客户的需求。
毕赤酵母，是甲醇营养型酵母中的一类能够利用甲醇作为碳源和能源的酵母菌。与其它酵母一样，在无性生长期主要以单倍体形式存在，当环境营养限制时，常诱导2个生理类型不同的接合型单倍体细胞交配，融合成双倍体。其具有调控严谨，表达强度高，易于高密度发酵和能进行蛋白后修饰等优点，许多异源蛋白在毕赤酵母中成功表达。 此外，由于其具有作为细胞工厂的显著优点，除了重组蛋白外， S-腺苷-L-蛋氨酸和 D-阿拉伯糖等初级和次级代谢产物，也开始在毕赤酵母中进行生产。通过代谢工程改造不仅能够建立新的代谢通路，使菌株能够生产异源代谢产物，还能够调整菌株的代谢通量或删除一些代谢通路，从而提高同源蛋白或同源代谢产物的产生。因此毕赤酵母基因编辑在代谢工程中应用广泛。
传统λRed同源重组法：
毕赤酵母基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点：首先，由于RecBCD具有核酸外切酶活性，线性的打靶DNA将被降解，打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组；其次，打靶片段需要较长的同源臂，往往长达几百个碱基，而且同源重组效率低，往往不能得到所需的重组子。
图1 传统λRed同源重组法
CRISPR/Cas9基因编辑技术：
CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA（guide RNA）来识别目的基因组序列，并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链，形成双链断裂，损伤后修复会造成基因敲除或敲入等，最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法，CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快，无痕，结果更准确，非常便于您开展后续的实验研究。
图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术
服务内容：
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服务内容 |
周期 |
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基因敲除 |
客户提供： * 需改造的菌株信息：模式菌株/野生型菌株 * 敲除的序列信息：NCBI查询编号 |
2-3个月 |
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基因敲入或点突变 |
客户提供： * 需改造的菌株信息：模式菌株/野生型菌株 * 敲入的序列信息/突变位点信息 |
1-2个月 |
卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务，主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属，具体情况还需与我们专业的技术人员联系。
交付：
--经过基因编辑且验证正确的菌株（抗性验证或测序验证）
--原始数据及完整项目报告
服务优势：
--项目开始前详细的评估方案
--快速的实验周期，节省客户成本
--实验过程中按阶段反馈项目进展，及时与客户沟通项目，促进项目快速运转
--成熟的实验技术，实现无疤痕基因组编辑
--多种微生物的基因编辑系统，适用于客户的多种项目
--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持
如何订购？
如果您对我们的服务项目感兴趣，请直接拨打热线电话：+86-400-621-6806或发送邮件至info@kmdbioscience.com
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