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卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。
枯草杆菌(Bacillus subtilis)是芽孢杆菌属的一种,广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖而得名。无荚膜,有鞭毛,能活动,革兰氏染色为阳性。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时常形成皱壁,为需氧型细菌。可以利用蛋白质、 多种糖,分解色氨酸。其中枯草杆菌在生物防治上很具有潜力,在温度和通气等适宜条件下,幼龄细胞中大量形成芽孢。另外,枯草杆菌生长速度快,对营养要求比较低,能有效分泌许多蛋白及代谢产物,且其不会产生毒素,是一种无致病性的安全微生物。在医药卫生食品等方面用途很广。
传统λRed同源重组法:
枯草芽孢杆菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。
图1 传统λRed同源重组法
CRISPR/Cas9基因编辑技术:
CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。
图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术
服务内容:
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服务内容 |
周期 |
基因敲除 |
客户提供: * 需改造的菌株信息 * 敲除的序列信息 |
5-8周 |
基因敲入或点突变 |
客户提供: * 需改造的菌株信息 * 敲除的序列信息/突变位点信息 |
5-8周 |
卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无疤痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系。
服务优势:
--快速的实验周期,节省客户成本
--成熟的实验技术,实现无疤痕基因组编辑
--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目
--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持
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