服务电话:400-621-6806
地址:天津市武清区国际企业社区A5号楼五层,301700
邮箱:info@kmdbioscience.com
微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。 卡梅德生物(KMD Bioscience)从事
不动杆菌 (Acinetobacter) 为革兰阴性杆菌,大小为(0.9~1.6)μm×(1.5~2.5)μm,革兰染色有时不易脱色,多为球杆状、常呈双排列,可单个存在,有时形成丝状和链状,黏液型菌株有荚膜,无芽孢,无鞭毛。本菌属非发酵菌是条件致病菌,当机体抵抗力降低时易引起机体感染,是引起医院内感染的重要机会致病菌之一。本属细菌专性需氧,适宜生长温度为35℃;营养要求不高,在普通培养基上生长良好;在麦康凯培养基上生长良好,无色或粉红色菌落,部分菌株呈黏液状;在血平板上形成圆形、光滑、湿润、边缘整齐的灰白色菌落(溶血不动杆菌可产生β溶血)。近年来,不动杆菌的耐药性呈上升趋势,通过基因编辑的技术对其进行靶基因的插入、敲除及替换,以期为降低不动杆菌的致病性和耐药性提供有力的工具。
传统λRed同源重组法:
不动杆菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。
图1 传统λRed同源重组法
CRISPR/Cas9基因编辑技术:
CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。
图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术
服务内容:
|
服务内容 |
周期 |
基因敲除 |
客户提供: * 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株 * 敲除的序列信息:NCBI查询编号 |
4-5个月 |
基因敲入或点突变 |
客户提供: * 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株 * 敲入的序列信息/突变位点信息 |
2-3个月 |
卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系。
交付:
--经过基因编辑且验证正确的菌株(抗性验证或测序验证)
--原始数据及完整项目报告
服务优势:
--项目开始前详细的评估方案
--快速的实验周期,节省客户成本
--实验过程中按阶段反馈项目进展,及时与客户沟通项目,促进项目快速运转
--成熟的实验技术,实现无痕基因组编辑
--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目
--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持
如何订购?
如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-400-621-6806或发送邮件至info@kmdbioscience.com