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大肠杆菌基因编辑

卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。

大肠杆菌(Escherichia coli),又叫大肠埃希氏菌,是较为常见的一类模式微生物和生物工程领域应用广泛的宿主菌。在相关基础研究及应用过程中, 往往需要对大肠杆菌的遗传性状进行改造。 其中基因组编辑通过在染色体水平上进行靶基因的敲除、 插入或替换, 可以稳定地实现大肠杆菌的多靶点的遗传性状的改变, 目前已经成为大肠杆菌代谢工程研究重要的方法之一。

 

传统λRed同源重组法

 

同源重组是原核生物获得遗传多样性的一种手段,是其基因组的主要进化机制之一。同源重组包括 RecA 重组系统和 Red 重组系统。RecA 重组系统是大肠杆菌自身存在的一种重组系统,由 RecA 蛋白和辅助蛋白(如 RecBCD、RecFOR 等)组成。而 λ-Red 重组系统是来自 λ 噬菌体的一种重组系统,1998 年被首次应用于大肠杆菌染色体改造。FLP/FRT 重组系统和 Cre/lox 重组系统中的重组酶均属于酪氨酸重组酶。其中 FLP/FRT 重组系统经常和 λ-Red 重组系统结合使用,作为基因重组之后抗性消除的辅助手段。

 

图1 传统λRed同源重组法

 

CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。

 

 图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

服务内容

 

 

服务内容

周期

基因敲除

客户提供:

* 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株

* 敲除的序列信息:NCBI查询编号

2-3个月

基因敲入或点突变

客户提供:

* 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株

* 敲入的序列信息/突变位点信息

1-2个月

卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌枯草芽孢杆菌沙门氏菌毕赤酵母酿酒酵母白色念珠菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系

 

交付

 

--经过基因编辑且验证正确的菌株(抗性验证或测序验证)

--原始数据及完整项目报告

 

服务优势

 

--项目开始前详细的评估方案

--快速的实验周期,节省客户成本

--实验过程中按阶段反馈项目进展,及时与客户沟通项目,促进项目快速运转

--成熟的实验技术,实现无痕基因组编辑

--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目

--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持

 

如何订购?

 

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