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酿酒酵母基因编辑

卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又叫面包酵母或芽殖酵母。一般呈球形、卵圆形、椭圆形,有的呈圆柱状、柠檬形等。酿酒酵母细胞有两种生活形态:单倍体和二倍体。酵母单倍体的繁殖比较简单,一般是出芽生殖;二倍体细胞主要进行有丝分裂繁殖。作为一种单细胞真核生物,酿酒酵母具有一切真核细胞生命活动的基本特征,又有实验所需微生物应具备的背景清楚、生长迅速、操作方便等许多优点。酿酒酵母作为一种背景清晰的工程模式菌,其实用性和科研实践中的有效性都得到了充分的体现,通过基因编辑对其进行改造,使其用于更多产物的工业化生产应用。

 

传统λRed同源重组法

 

酿酒酵母基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于载体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。

图1 传统λRed同源重组法

 

CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。

 

 

 图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

服务内容

 

 

服务内容

周期

基因敲除

客户提供:

* 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株

* 敲除的序列信息:NCBI查询编号

2-3个月

基因敲入或点突变

客户提供:

* 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株

* 敲入的序列信息/突变位点信息

1-2个月

 

卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌枯草芽孢杆菌沙门氏菌毕赤酵母酿酒酵母白色念珠菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系

 

交付

 

--经过基因编辑且验证正确的菌株(抗性验证或测序验证)

--原始数据及完整项目报告

 

服务优势

 

--项目开始前详细的评估方案

--快速的实验周期,节省客户成本

--实验过程中按阶段反馈项目进展,及时与客户沟通项目,促进项目快速运转

--成熟的实验技术,实现无痕基因组编辑

--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目

--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持 

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-400-621-6806或发送邮件至info@kmdbioscience.com