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卡梅德生物(KMD Bioscience)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,有效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的编辑服务,以满足客户的需求。
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又叫面包酵母或芽殖酵母。一般呈球形、卵圆形、椭圆形,有的呈圆柱状、柠檬形等。酿酒酵母细胞有两种生活形态:单倍体和二倍体。酵母单倍体的繁殖比较简单,一般是出芽生殖;二倍体细胞主要进行有丝分裂繁殖。作为一种单细胞真核生物,酿酒酵母具有一切真核细胞生命活动的基本特征,又有实验所需微生物应具备的背景清楚、生长迅速、操作方便等许多优点。酿酒酵母作为一种背景清晰的工程模式菌,其实用性和科研实践中的有效性都得到了充分的体现,通过基因编辑对其进行改造,使其用于更多产物的工业化生产应用。
传统λRed同源重组法:
酿酒酵母基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于载体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。
图1 传统λRed同源重组法
CRISPR/Cas9基因编辑技术:
CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。
图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术
服务内容:
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服务内容 |
周期 |
基因敲除 |
客户提供: * 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株 * 敲除的序列信息:NCBI查询编号 |
2-3个月 |
基因敲入或点突变 |
客户提供: * 需改造的菌株信息:模式菌株/野生型菌株 * 敲入的序列信息/突变位点信息 |
1-2个月 |
卡梅德生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系。
交付:
--经过基因编辑且验证正确的菌株(抗性验证或测序验证)
--原始数据及完整项目报告
服务优势:
--项目开始前详细的评估方案
--快速的实验周期,节省客户成本
--实验过程中按阶段反馈项目进展,及时与客户沟通项目,促进项目快速运转
--成熟的实验技术,实现无痕基因组编辑
--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目
--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持
如何订购?
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